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人白細(xì)胞介素28(IL-28)elisa試劑盒檢測技術(shù)

更新時間:2017-05-23      瀏覽次數(shù):1301

人白細(xì)胞介素28(IL-28)elisa試劑盒基本信息

中文名稱白細(xì)胞介素-28

英文名稱interleukin-28;IL-28

定  義包括IL-28A(即IFN-λ2)和IL-28B(即IFN-λ3)。IL-28B表達于病毒感染的單個核細(xì)胞等,能保護細(xì)胞抵御病毒感染,免疫調(diào)節(jié)。

應(yīng)用學(xué)科 免疫學(xué)(一級學(xué)科),免疫系統(tǒng)(二級學(xué)科),免疫分子(三級學(xué)科)

人白細(xì)胞介素28(IL-28)elisa試劑盒檢測技術(shù)

雙抗體夾心法

  1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。

  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。

  3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。

  4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。

  5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

  6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

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